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Calcein AM Cell Viability Assay Kit
  • 产品货号:
    BN16003
  • 中文名称:
    Calcein AM Cell Viability Assay Kit
  • 英文名称:
    Calcein AM Cell Viability Assay Kit
  • 品牌:
    Biorigin
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN16003-200T

    200T

    ¥600.00

    其他培养试剂

  • BN16003-1000T

    1000T

    ¥2500.00

  • BN16003-50T

    50T

    ¥180.00

产品描述

产品内容:

100 μL Calcein AM, 2 mM in 无水 DMSO(200T) 

500 μL Calcein AM, 2 mM in 无水 DMSO(1000T) 

应用范围:活细胞荧光示踪探针

产品参数 

λEx/λEm (calcein) = 494/517 nm (pH 8) 

储存条件 

本产品-20℃避光保存,推荐条件下可以保存 6 个月。

产品介绍 

Calcein , AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它可以穿透细胞膜进入细胞,被细胞内的酯酶剪切 Calcein。Calcein 带高度负电荷,可以被滞留在正常细胞的 胞质内,发出明亮的绿色荧光。由于其低毒性,Calcein , AM 可以用于研究细胞膜的完整性和长期细胞示踪实验。此外,它也可以被用于定量活细胞数。Calcein AM Cell Viability Assay 是在细胞活力检测中,用来定量活细胞数的终点检测法。试剂盒测定所产生的荧光信号与样品中的活细胞数成正比(图 1)。

image.png

图 1. 用 Calcein AM Cell Viability Assay Kit 定量 HeLa 细胞 数。细胞在检测前 24 h 接种于 96 孔板内。

使用方法 

1. Calcein , AM 工作液的配置 

 1. 从冷冻状态下取出 Calcein , AM 储存液原管,静置 30 min 使其恢复至室温。 

 2. 在 10 mL 的 PBS 中加入10 μL 的 2 mM Calcein, AM 储存液,涡旋混匀,配置成 2 μM 的 Calcein, AM 工作液。 

注:Calcein, AM 工作液的推荐浓度为 0.1-10 μM,最佳使用浓度由具体的细胞类型决定。2 μM 的 Calcein, AM 工作液适用于以下类型的细胞:NIH3T3, PtK2, HeLa 和 MDCK。

2. 细胞活力检测 

 1. 按实验要求将细胞接种于 96 孔培养板,推荐使用黑色板壁的培养板用于荧光检测。对于贴壁细胞,需在检测前一天铺板,并设定空白对照孔。 

 2. 根据实验要求对细胞进行适当处理。 

 3. 吸除每孔培养液。

 注:培养基中的血清可能含有酯酶活性,会增强背景荧光。因而这一步操作中,可用 PBS 清洗细胞,以降低残留血清的影响。 

 4. 每孔加入 100 μL 的 2 μM Calcein, AM 工作液。 

 5. 37℃孵育 30 min 或者更长时间。 

 6. 用激发波长为 485 nm,发射波长为 530 nm 的荧光检测仪测量培养板内的荧光。

注意事项 

 Calcein , AM 遇到湿气会分解,使用后请在-20℃下密闭冷冻保存,防止水分进入。