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依科赛小课堂丨血清使用过程中常见问题解答
伙伴们,依科赛学院叒开课啦!本次小编为大家带来血清使用过程中常见问题解答,希望对大家日常实验有所助力~


Q1:应该如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损 ?


建议血清应保存在-10℃及以下。若一次无法用完一瓶,无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。解冻时,建议将血清从冷冻室先移至2-8℃冰箱解冻,再放置于室温进行彻底解冻。请注意,解冻过程中需要经常摇晃混合。严禁将FBS在37℃长时时间孵育解冻。


Q2:培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗 ?


一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在2周内使用它。


Q3:如果我的FBS到达时已经部分解冻,还能使用吗 ?


所有的ExCell Bio血清都在冰冻状态下由干冰运输,因此您收到时应该仍是冰冻状态。如果只是部分解冻,FBS仍然可以使用,但是建议先将FBS在冰箱中充分解冻,之后温和的摇晃摇匀,再移至-10℃及以下进行储存。


Q4:不同批次血清颜色为什么有差异 ?


血清中含有微量的血红蛋白,与采集血液过程中血细胞的破裂数目有关,只要血红蛋白的含量在药典规定范围内,颜色的深浅和血清品质无关,不影响细胞培养。中国药典规定血红蛋白含量≤200mg/L。


Q5:热灭活是必须的吗 ?


实验显示,热灭活对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热灭活的血清,会增加沉淀产生的概率,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。热灭活过程中局部温度过高,摇晃不均匀,灭活时间过长,都会造成血清品质下降。若非必须,可以不需要做热灭活这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!


Q6:血清使用前是否有必要热灭活,如何热灭活?


请先确认细胞培养实验方案是否需要对血清进行热灭活。一般不建议热灭活,热灭活处理会损失血清中部分营养成分,并且容易发生蛋白质聚集沉淀;少数对补体敏感的实验需要(如某些免疫学实验,腺病毒包装,某些PS培养等),可酌情使用热灭活血清。热灭活方法:血清完全解冻充分摇匀后置于56℃水浴中30min,期间不时晃动均匀。


Q7:细胞培养中出现黑点是污染吗 ? 如何处理 ?


一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否浑浊,然后在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变浑浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:①细胞生长过老,破碎的细胞残骸;②配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;③培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除;④血清等级不足以维持细胞良好的生长。


Q8:FBS中含有的絮状物是什么东西 ?


FBS中的絮状物可能由很多种原因造成,其中最常见的沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋白,不会影响血清品质,沉淀若需去除,视沉淀大小500-1000×g,离心5-10min去除,也可不做处理。


Q9:为什么要使用正规进口的血清?


①走私血清缺乏检验检疫监管,冷链运输无法保障,严重影响血清批内和批间稳定性,实验数据结果不可控;②正规的血清来源于中华人民共和国海关总署允许进口的非疫区国家,而很多走私的血清往往来自发生过疫情的国家。未经检疫的血液制品中可能携带传染性物质,一旦流入境内,可能会对试者和研究人员的生命健康造成威胁。


Q10:为什么选择依科赛血清?


依科赛生物作为中国第一家胎牛血清民族品牌,从2006年第一款牛血清上市至今,凭借过硬的产品品质,以其“正宗血源、正规进口”的合法进口安全性,深受客户的喜爱,助力和见证了生命科学产业的一次又一次的突破和发展!

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依科赛胎牛血清均采自非疫区的健康牛,经无菌采集、批量混合、3级100 nm过滤器过滤分装而成,不含支原体和BVDV、PI3、IBR、BTV等牛源病毒。


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