又是一年毕业季,师兄师姐们都走了。STZ诱导糖尿病的重任都交给了我!而我,初遇造模实验的菜鸟一枚,翻阅了很多文献,仍然很困惑,不知道如何做好!
Hi,初遇造模实验的同学您好亚~MP认为,做好STZ诱导建立糖尿病模型实验,可以先搞清楚以下基本问题。
1. 用STZ如何诱导I型糖尿病和Ⅱ型糖尿病,方法是否有差异?
3. 实验动物如何选择?与性别,年龄及体重是否有关系?
4. 如何确定动物给药量?
5. STZ使用有哪些注意点?
链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)是一种由链球菌产生的葡萄糖—亚硝脲,含N—亚硝基化合物。20世纪人们发现STZ对哺乳动物(大鼠、小鼠、狗、兔、猴等)胰岛β细胞具有特异毒性,这使得后来STZ被用于诱导建立糖尿病动物模型及治疗胰岛β细胞瘤。
相比于其他诱导糖尿病的方法,STZ诱导糖尿病法对机体组织毒性小,动物存活率高,得到众多研究人员的推崇,是目前国内外糖尿病造模使用最为广泛的一种方法。
方法:I型糖尿病显著的病理生理学特征为胰岛β细胞数量显著减少和消失所导致的胰岛素分泌显著下降或缺失。采用较大剂量一次性注射的给药方法,可直接引起胰岛β细胞的广泛破坏,造成Ⅰ型糖尿病模型。
优势:方法简便,成模时间短,成模率高,与人类I型糖尿病表现非常相似。
方法:Ⅱ型糖尿病显著的病理生理学特征为胰岛素调控葡萄糖代谢能力的下降(胰岛素抵抗)伴随胰岛β细胞功能缺陷所导致的胰岛素分泌减少(或相对减少)。
采用高糖高脂饲养并配合低剂量注射的方法,可建立Ⅱ型糖尿模型。胰岛素抵抗可以通过高糖、高脂饮食实现。而胰岛细胞功能缺陷引起的胰岛素分泌减少一般采用STZ诱导。
优势:实验周期短、方法简便、相对可靠稳定、造模成本低、且诱导的Ⅱ型糖尿病模型症状和发病机制与人类Ⅱ型糖尿病非常相似。
1.鼠类作为目前应用最广的糖尿病动物模型,因其体积小、生长周期短、经济易得、易于实现基因修饰等,较其他种属有着无可比拟的优势。因此,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。
2.有文献报道,雌性动物成模率差,而且可能会比雄性出现更高的死亡率,尤其是 I 型。因此推荐选择雄性动物。
3.Ⅰ型糖尿病推荐动物体重、周龄:大鼠 170-200g,小鼠 17-22g,适应性喂养 1-2 周后腹腔注射 STZ。动物体重过重,对 STZ 的耐药性加强,成模率随之降低。
4.Ⅱ型糖尿病推荐动物体重、周龄:大鼠 4-5 周龄,体重在 90-100g ,高脂高糖饲料喂养4-8 周,体重约达 240-280g;小鼠 4-5 周龄,体重在 16-20g ,高脂高糖饲料喂养 4-8 周,体重约达30-35g。
对于新购入的动物或者更换饲养环境的动物,需要先用普通饲料适应性喂养1-2 周,然后再选择适合周龄/体重的动物改用高脂高糖饲料继续喂养。
1.给药剂量是影响造模成功的最大因素,动物体重不同,STZ给药量也不同。一般情况下,STZ 剂量(mg/kg)高低和体重大小成反比。
2.大鼠I型糖尿病模型,可用65-70mg/kg一次性给药或分次注射,如35mg/kg,2次。大鼠Ⅱ型糖尿病模型,先喂养4-8周高脂(高糖)饲料,可用35-50mg/kg一次性给药。
3.小鼠I型糖尿病模型,可用150-220mg/kg一次性给药或分次注射,如100mg/kg,2次。小鼠Ⅱ型糖尿病模型,先喂养4-8周高脂(高糖)饲料,可用70-120mg/kg 一次性给药。
1.要尽量避免反复称量,因为STZ比较容易受潮,在反复称量过程中很容易接触到空气中的潮气,受潮30min后会失效,STZ水溶液也不稳定。
2.第一次使用时可根据估算的单次用量分装(操作环境,容器,分装工具都必须保证干燥)。
3.分装后用封口膜密封瓶口,铝箔纸或锡箔纸避光包好,放入干燥罐内,-20℃冻存。
4.尽量做到新鲜配制,现用现配。
以上就是关于STZ诱导建立糖尿病模型实验的基础内容了,初遇造模实验的您可能还会有诸多疑问:如何判断造模是否成功?四氧嘧啶与STZ造模有何区别?......不如期待下回分解,同时也欢迎留言告诉我们您在造模过程中遇到的困惑~
MP链脲佐菌素产品信息
货号:0210055705
包装:100 mg;500 mg;1 g;5 g
高纯度
成模快速稳定
适用于Ⅰ型及Ⅱ型糖尿病模型
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