人血液中的胆固醇主要以低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL),以及少量极低密度脂蛋白(VLDL)的形式存在,总胆固醇中约2/3为酯型,1/3为游离型。游离胆固醇是指未与脂肪酸结合的胆固醇,在维持细胞膜柔韧性、信号传递和激素合成中发挥至关重要的作用。游离胆固醇的平衡对维持细胞的正常功能至关重要,其水平异常可作为多种疾病的判断指标。
胆固醇酯一般约占总胆固醇的70%~80%。该比例降低常见于急慢性肝炎、肝硬化、肾病综合征、慢性炎症性疾病等。因此,检测胆固醇酯比值可作为肝实质损伤的评估指标。
本产品是一款用于检测样本中游离胆固醇的试剂盒。采用微孔板法,可快速简便地定量检测样本中的游离胆固醇。
【注意】LabAssay™ 系列仅供实验研究用,不可用于疾病诊断。
检测原理
向样本中加入显色试剂后,样本中的游离胆固醇在胆固醇氧化酶(CO)的作用下被氧化,同时生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化作用下,与DAOS和4-氨基安替比林发生定量氧化缩合反应,生成蓝色醌类色原。通过检测该蓝色色原的吸光度,即可计算出样本中的游离胆固醇浓度。
试剂盒性能
※ 对添加标准品的培养基作为添样本进行验证。
检测可行性因培养基、细胞种类和培养条件等因素而异。使用细胞培养上清作为样本时,请在实验前,在所用培养基中进行加标回收试验和稀释线性试验。
标准曲线示例
选择LabAssay™ 游离胆固醇检测试剂盒的四个理由
仅需少量样本即可快速检测!
仅需10 μL样本量,支持动态监测和多项目检测!检测时间仅需20分钟!
支持多种样本类型
除人样本外,已积累小鼠、大鼠、犬、猫及培养基的评估数据!
检测结果与自动化设备用试剂高度相关
可计算胆固醇酯比值
数据
批内精密度试验
使用本产品,分别对两种不同浓度的人血清/血浆(EDTA)样本进行5次检测,评估试剂精密度。
【结果】
人血清的CV值(%)为0.4-0.9%,人血浆(EDTA)的CV值为0.6-0.9%,批内精密度良好。
批间精密度试验
使用本产品,连续4天对两种不同浓度的人血清/血浆(EDTA)进行重复性检测,确认批间精密度。
【结果】
人血清的CV值(%)为2.2-2.3%,人血浆(EDTA)的CV值为2.8-2.9%,批间精密度良好。
稀释线性测试
使用产品附带的标准品稀释液,对人,小鼠,大鼠,犬,猫的血清/血浆(EDTA),以及添加了标准品的D-MEM培养基,RPMI培养基倍比稀释后,进行双重复检测,确认线性。
(请上下滑动查看)
【结果】
所有样本在检测范围内均呈现良好的线性。
加标回收试验
分别向人,小鼠,大鼠,犬,猫的血清/血浆(EDTA)以及培养基(D-MEM,RPMI)中添加三种浓度的标准品,并进行双重复检测。
人样本
小鼠(BALB/c)样本
大鼠(SD大鼠)样本
犬(比格犬)样本
猫(日本猫)样本
培养基
【结果】
所有样本均呈现良好的回收率。
与全自动生化分析仪用试剂的相关性
使用本产品(LabAssay™ 游离胆固醇)和全自动生化分析仪用试剂,对人血清/血浆(EDTA)中的游离胆固醇进行检测,并确认相关性。
【结果】
确认LabAssay™ 游离胆固醇和全自动生化分析仪用试剂的检测值呈高度相关性。
样本检测实例
(请上下滑动查看)
小鼠(BALB/c)样本
大鼠(SD大鼠)样本
犬(比格犬)样本
猫(日本猫)样本
胆固醇酯比值计算示例
使用LabAssay™ 游离胆固醇(本产品)与 LabAssay™ 总胆固醇(产品编号:293-93601),可计算血液中的胆固醇酯比值(酯比)。酯比是指胆固醇酯占总胆固醇的百分比。由于胆固醇酯可通过总胆固醇值减去游离胆固醇值计算得出,因此酯比可按以下公式计算。下表为人、小鼠、大鼠、犬、猫样本的计算结果示例。
【计算公式】
(请上下滑动查看)
人 样本
小鼠(BALB/c)样本
大鼠(SD大鼠)样本
犬(比格犬)样本
猫(日本猫)样本
※ 总胆固醇使用本公司LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒(产品编号293-93601)检测。
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