14. Corning® Matrigel® matrix可以反复冻融吗?
建议用户第一次融化后按照单次用量进行分装,保存。
15. 为什么细胞没有贴壁?Matrigel 也脱落了?
首先需要检查细胞的接种浓度是否过高,Corning Matrigel的用量应等同于细胞培养体系中培养基的用量。如果Corning® Matrigel® matrix被稀释到过低的浓度,形成的胶体容易从组织培养器皿表面分离。
16. 未稀释的Corning® Matrigel® matrix中出现的沉淀应该怎么样处理?
4°C下低速离心,去除沉淀物 。
17. 未使用完的Corning® Matrigel® matrix应该怎样保存的?
与细胞培养基或缓冲液混合过但未使用完的Corning® Matrigel® matrix,不建议保留再用。
18. Corning® Matrigel® matrix中含有 DNA和/或RNA吗?
是的。Corning® Matrigel® matrix没有经过DNA酶或RNA酶消化处理,可能会含有痕量的DNA、RNA。
19. Corning® Matrigel® matrix中有血管内皮生长因子(VEGF)和金属蛋白酶(MMPs)吗?
在标准浓度的Corning® Matrigel® matrix中含有 5.0-7.5 ng/mL 的血管内皮生长因子( VEGF),GFR Corning® Matrigel® matrix中VEGF含量为1.0-1.5 ng/mL。另外,可能含有老鼠肿瘤细胞来源的痕量金属蛋白酶(MMPs)。
20. Corning® Matrigel® matrix中有 LDEV吗?
没有的。Corning® Matrigel® matrix经免疫方法及PCR方法检测,并不含有乳酸脱氢酶增高病毒(LDEV)或者乳酸脫氫脢增生病毒(LDHV) 。此外,我们还针对小鼠群体及肿瘤来源筛查了其他种类的病毒。详细信息请参见产品说明书。
21. Corning® Matrigel® matrix中有尿素吗?
没有的。在Corning® Matrigel® matrix生产准备过程中使用过尿素,后续流程中经过透析方法已经去除了。
22. Corning® Matrigel® matrix中使用的什么缓冲液?
低葡聚糖 DMEM (1g/L),其中包含 50 µg/mL 庆大霉素。
23. Corning® Matrigel® matrix 中含有纤维连接蛋白(Fibronectin)吗?
是的,通过使用Western Blot检验,我们在Matrigel matrix中发现了微量的纤维连接蛋白(Fibronectin)
24. Corning® Matrigel® matrix 中含有玻璃体结合蛋白( vitronectin)吗?
某些EHS组织中可能含有微量的血液,因此Corning® Matrigel® matrix中可能会有痕量的玻璃体结合蛋白(Vitronectin) 。
25. Corning® Matrigel® matrix 中还有什么别的物质?
Corning® Matrigel® matrix 中还可能含有浓度小于 0.02%的三氯甲烷,以及肿瘤细胞的产生的其他未知蛋白或分子。
26. 提取过程会引起层粘连蛋白变性吗?
不会的,不会引起层粘连蛋白变性。
27. Corning® Matrigel® matrix 可以储存在 -70℃吗?
是的。Matrigel matrix 可以储存在-70℃。建议客户将整瓶的 Matrigel matrix 进行分装,储存于聚丙烯或其他可以耐受超低温条件材质的小管中,方便保存和使用。
28. Corning® Matrigel® matrix 的折射率是多少?
20°C 条件下,Corning® Matrigel® matrix 的折射率是 1.3406 到 1.3407,相对折射率为1.0056(同等条件下,水的折射率为 1.333)。
29. Corning® Matrigel® matrix 会有自发荧光吗?
Corning® Matrigel® matrix 是一种蛋白混合物,经过透析处理后溶解在 DMEM 培养基中。为防止微生物污染,培养基中添加了庆大霉素。所以 Corning® Matrigel®matrix 可能引发荧光的组分包括其中的蛋白质成分,维生素成分以及庆大霉素(氨基糖苷类抗生素)。如果需要使用荧光检测细胞生长状态,建议使用者建立对照实验,在所需要的波长条件下进行对比,以便排除背景荧光。
30. 使用 Matrigel 培养的细胞,如果需要进行切片或者免疫组织化学及免疫荧光检验,该怎样固定呢?如何避免解聚?
可以使用 2%浓度的多聚甲醛进行固定。为避免固定后出现解聚的情况,可以加入 1%浓度的戊二醛。戊二醛作为固定剂,常用于电镜观察。如果用户需要进行免疫荧光检验,加入戊二醛后,会出现明显的背景荧光。为了解决这一问题,我们建议用户在固定之后,使用 NaBH4 进行淬灭。NaBH4 极易气泡,进行该步骤时,必须在水平操作台上小心操作,避免晃动,尽量减少气泡的形成。另外,用户也可以尝试使用较低浓度的戊二醛进行固定,如 0.1%到 0.5%,浓度越低,背景荧光信号越少。
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