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葡聚糖凝胶 G-100中颗粒
  • 产品货号:
    BN26008
  • 中文名称:
    葡聚糖凝胶 G-100中颗粒
  • 英文名称:
    Sephadex G-100
  • 品牌:
    Biorigin
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN26008-25g

    25g

    ¥610.00

  • BN26008-100g

    100g

    ¥1880.00

  • BN26008-500g

    500g

    ¥7840.00

产品描述

1 化学和物理性质

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。 

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。

2 产品说明

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使用方法 

Sephadex 系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅拌,因为它可能破坏填料,不要使用磁力搅拌器。

3.1 填料的准备 

(1)将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀 3 小时,或用热水膨胀 1 小时。洗脱缓冲 液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有碎胶,请去除。 

(2)将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度。

3.2 装柱 

(1)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。 

(2)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。

(3)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶 在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。 

(4)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填 料最大耐压)。

3.3 平衡

上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 PH 值和等电点等于上 柱的 Buffer 的 PH 值和等电点)。 

3.4 上样

样品一定要离心或过滤后(0.45um)上样。 凝胶过滤的上样量一般为不大于 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在 1-2%的柱床体积,视分离 情况可以调整;脱盐时上样量可以达到 20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高过高的凝胶 层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为 5:1 即 可。 

3.5 洗脱方法 

可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脱或盐梯度洗 脱也可以完全分离纯化。

3.6 在位清洗(CIP) 

凝胶使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以 40cm/h 用 0.1 M 氢氧化钠洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

4 保存 

使用完的填料,用纯水将盐分彻底冲洗,最后保存在 20%乙醇中,4℃保存。

注意事项: 

1.上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。 

2.在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.15 摩尔。碱会使流速变慢。 

3.不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。