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环氧活化-琼脂糖凝胶6B
  • 产品货号:
    BN26090
  • 中文名称:
    环氧活化-琼脂糖凝胶6B
  • 英文名称:
    Epoxy activated Sepharose 6B
  • 品牌:
    Biorigin
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN26090-100mL

    100mL

    ¥3600.00

  • BN26090-25mL

    25mL

    ¥1110.00

产品描述

一、 简介 

环氧活化琼脂糖凝胶是采用平均粒径为90μm的6%交联琼脂糖凝胶,表面用大分子糖链接枝,使它 有更高的比表面积和更好的生物兼容性,用它合成的亲和填料,避免蛋白之间位阻以及蛋白和填料的位 阻干扰,使其同等配基下有更高载量,同时具有更高的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也 更短。即使是纯化病毒、抗体等生物大分子物质,载量也基本保持不变。

     产品特点: 

      1、偶联条件温和,偶联效率高。

      2、填料不需要处理,直接计算合适的量用于偶联,缩短时间。

      3、刚性强,流速快。 

      4、可偶联含有氨基、巯基、羟基的配基,应用范围广。

      5、偶联后制备的亲和填料寿命长,流速快,特异性高。

二、 填料特性: 

         基质 高度交联琼脂糖凝胶 

         适用范围 带氨基、巯基、羟基的物质(多糖,蛋白,核酸,抗体以及其他物质) 

         功能基团 epoxy 

         配基密度 15-30μmol/ml 

         平均粒径 90μm

         最大流速 200cm/h

三、操作步骤 

用环氧活化琼脂糖凝胶6B偶联牛血清白蛋白(BSA)为例: 

1、 取BSA 100mg溶解于10ml的pH9.0 0.25M碳酸钠缓冲液中; 

2、 用量筒量取环氧活化琼脂糖凝胶6B 5-6mL; 

3、 将凝胶加入溶解后的BSA溶液中混合,在摇床上振荡,25℃偶联6h; 

4、 然后加50mg甘氨酸,再反应6h,封闭剩余的基团。 

5、偶联了BSA的填料可以装在柱子中,然后用1M NaCl溶液洗10个柱床体积,收集装柱子的液体以 及清洗柱子的溶液测定BSA的总量,再用纯水冲10个柱床体积,最后将填料在20%乙醇溶液中保 存。如果是大量的偶联,可以选择G3砂心漏斗或者滤器上按上面的方法清洗,用20倍填料体积, 分3-5次清洗。 

6、BSA的偶联量为6 mg/mL。计算方法:BSA的吸附载量=(G0-G1)/V。 

     G0:BSA总使用量,单位:mg。

     G1:偶联反应后未偶联的BSA的量,单位:mg。  

      V :填料的体积,单位:mL。  

     备注:该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白,均能获得很好的偶联效果。  

环氧活化的填料的应用注意事项: 

1、活化的填料现取现用,以免时间过长造成偶联活性降低。如果要偶联的蛋白不稳定,可在摇床上 4℃振摇偶联12-16小时,以维持配基的活性。如果没有把握可以配相应浓度的配基溶液0.5-1ml,分别 选择不同pH及温度然后不加填料模拟偶联条件,到时间观察溶液是否有沉淀,如果有沉淀偶联效果就不 好,这时可以稍微降低pH或温度,同时可以加5%左右的甘油或PEG保护蛋白,避免沉淀,总之对于任何 配基最好能了解其溶解性及稳定性,避免实验失败导致损失。 

2、偶联配基后尽快清洗填料,避免在高pH条件中,配基失活。 

3、更稳定的配基可以直接溶解于NaOH溶液或者碳酸钠溶液中进行偶联,温度可适当提高,偶联时 间则相应缩短至1-4小时。 

4、偶联蛋白的最适pH为可以在8.0-10左右,在室温或4℃均可,温度与pH的提高均能增加配基的 吸附载量,根据蛋白的稳定选择合适的pH和温度,偶联蛋白溶液的浓度为5-20mg/ml。填料体积和配基 溶液的体积为1:1.5或者为1:2。 

5、偶联的缓冲液包括碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液,但绝对不能使用Tris、甘氨酸等含有氨基的 物质。

6、只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责 任。