应用范围：荧光标记染料

产品参数 

Ex/Em: 548/565 nm 

分子量：～766

贮存条件：-20℃避光保存, 可以储存 6 个月，可以采用 pH7.4 的 10mM Tris 溶解后，分装保存，避免反复冻融。

使用方法 

DNA 标记

1、试剂（自备） 

（1） Taq DNA 聚合酶 

（2）10× Taq reaction buffer 

（3）25 mM MgCl2 

（4）dATP, dTTP, dCTP, dGTP (单独溶液), 1 mM each 

（5）DNA 模板 

（6）正向、反向引物，10 μM each 

（7）PCR 清洁试剂盒

2、PCR 反应 

2.1 按照表 1 反应体系配制 PCR 反应混合液： 

2.2 每个反应管加 1μL 1mM Sulfo-Cy3-E-dUTP 注：阴性对照管，加 1 μL 1mM dTTP 代替 Sulfo-Cy3-E-dUTP 

2.3 按照表 2 程序运行 PCR 反应 

注：

1）热变性时间依据不同的 Taq 酶进行调整 

2）退火温度设置：Tm - 5℃ 

3）延伸时间根据扩增片段大小而定，一般 200-300 bp 片段设为 1 min 即可

2.4 可选步骤用 PCR 清洁试剂盒去除未掺入的单核苷酸

                              表 1 PCR 反应体系

                                 表 2 PCR 反应条件

2.5 取 10%的 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳（凝胶不加入DNA 染料），检测 PCR 反应的效率和特异性，通过紫外凝胶成像仪或激光凝胶扫描仪观察。 

注：凝胶染色前先观察染料的荧光，以免与下一步的凝胶染料发生荧光淬灭。

2.6 采用后染法，使用 DNA 凝胶染料对凝胶进行染色，观察总的 PCR 产物或阴性对照组的 PCR 扩增产物。