产品内容：

100 μL Calcein AM, 2 mM in 无水 DMSO（200T） 

500 μL Calcein AM, 2 mM in 无水 DMSO（1000T） 

应用范围：活细胞荧光示踪探针

产品参数 

λEx/λEm (calcein) = 494/517 nm (pH 8) 

储存条件 

本产品-20℃避光保存，推荐条件下可以保存 6 个月。

产品介绍 

Calcein , AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它可以穿透细胞膜进入细胞，被细胞内的酯酶剪切 Calcein。Calcein 带高度负电荷，可以被滞留在正常细胞的 胞质内，发出明亮的绿色荧光。由于其低毒性，Calcein , AM 可以用于研究细胞膜的完整性和长期细胞示踪实验。此外，它也可以被用于定量活细胞数。Calcein AM Cell Viability Assay 是在细胞活力检测中，用来定量活细胞数的终点检测法。试剂盒测定所产生的荧光信号与样品中的活细胞数成正比（图 1）。

图 1. 用 Calcein AM Cell Viability Assay Kit 定量 HeLa 细胞 数。细胞在检测前 24 h 接种于 96 孔板内。

使用方法 

1. Calcein , AM 工作液的配置 

 1. 从冷冻状态下取出 Calcein , AM 储存液原管，静置 30 min 使其恢复至室温。 

 2. 在 10 mL 的 PBS 中加入10 μL 的 2 mM Calcein, AM 储存液，涡旋混匀，配置成 2 μM 的 Calcein, AM 工作液。 

注：Calcein, AM 工作液的推荐浓度为 0.1-10 μM，最佳使用浓度由具体的细胞类型决定。2 μM 的 Calcein, AM 工作液适用于以下类型的细胞：NIH3T3, PtK2, HeLa 和 MDCK。

2. 细胞活力检测 

 1. 按实验要求将细胞接种于 96 孔培养板，推荐使用黑色板壁的培养板用于荧光检测。对于贴壁细胞，需在检测前一天铺板，并设定空白对照孔。 

 2. 根据实验要求对细胞进行适当处理。 

 3. 吸除每孔培养液。

 注：培养基中的血清可能含有酯酶活性，会增强背景荧光。因而这一步操作中，可用 PBS 清洗细胞，以降低残留血清的影响。 

 4. 每孔加入 100 μL 的 2 μM Calcein, AM 工作液。 

 5. 37℃孵育 30 min 或者更长时间。 

 6. 用激发波长为 485 nm，发射波长为 530 nm 的荧光检测仪测量培养板内的荧光。

注意事项 

 Calcein , AM 遇到湿气会分解，使用后请在-20℃下密闭冷冻保存，防止水分进入。