离心柱法提取原理
离心柱法核酸提取试剂盒产品特点:
安全低毒:试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚、氯仿抽提。
操作简便:30~40 min 内完成数个样品的DNA/ RNA 提取;
DNA提取试剂盒:
DNA纯度高:提取的基因组 DNA 片段完整、纯度高,可直接用 于下游 PCR 扩增、qPCR、分子标记以及文库构建等实验。
RNA提取试剂盒:
高效去除基因组 DNA:采用膜过滤及 DNase I 消化,高效去除基因组 DNA;
RNA 纯度高:提取的 RNA 无杂质残留,适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。
没有蛋白和其他杂质的污染,可直接 用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A 纯化、核酸保护和体外翻译等实验。
DNA提取常见问题
1.柱子出现堵塞?
1) 样品用量过多。建议按照说明书推荐量进行提取;
2) 样品富含多糖多酚类物质。处理富含多糖多酚的组织,推荐用专用试剂盒;
3) 离心温度过低。本产品使用操作均在室温下进行。
2.DNA 提取得率低?
1) 样品用量过少。建议按照说明书推荐量进行提取;
2) 样品材料质量不好。尽量选用新鲜组织样品,样品采集后应液氮速冻,然后置于-80℃保存,建议 尽快提取,避免反复冻融;
3) 样品裂解不充分。若样品过量则适当减少样品量,加入 Buffer GP1 后需涡旋振荡 1min 使其充 分混匀,可适当延长裂解时间。
3.提取的 DNA 中有 RNA 污染?
1) 未加入 RNase A 消化。请按照说明书要求加入 RNase A 消化;
2) 样品中 RNA 含量过多。可适当增加 RNase A 用量或延长消化时间。
RNA提取常见问题
1.柱子出现堵塞?
处理方法同DNA提取常见问题Q1。
2.提取的 RNA 出现降解?
1) 样品用量过多。影响裂解液的裂解能力,造成 RNase 未被充分抑制,导致 RNA 降解,建议参考 说明书推荐取样量,若要增加样品起始量,则后续实验中各溶液量均要按等比例增加。对于内源 RNase 含量较多的组织应减少样品量,适当增加裂解液用量;
2) 样品保存不当。反复解冻会引起 RNA 降解,尽量使用新鲜样品或者解冻次数不超过 2 次的样品;
3) 操作过程中引入 RNase 污染。请使用 RNase-Free 的工具、试剂和耗材;
4) 电泳过程中发生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、琼脂糖和电泳缓冲液等。
3.RNA 得率低?
1) 样品用量过多。样品过量会影响裂解效果,建议按照说明书要求适量取样;
2) 样品裂解不充分。请按照说明书的要求进行充分研磨、裂解;
3) 洗脱不充分。RNase Free H2O 需直接加到膜中央,并静置 2 min 后再离心,必要时可进行二次 洗脱以提高产量;
4) 吸附柱有乙醇残留。使用 Buffer PRW1 漂洗后需要开盖晾干吸附柱中的乙醇。
4.提取的 RNA 中有 DNA 污染?
1) 样品用量过多。超出试剂盒规定的样本量影响裂解液的裂解能力可能会导致基因组的污染;
2) 次生代谢物较多。次生代谢物含量高的样本在提取 RNA 时易出现基因组的污染;
3) 操作过程中需要进行去除基因组 DNA 的操作,若 DNA 含量较多,可延长 DNase I 消化时间或重复消化。
核酸提取产品信息
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