➤分离原理易懂，操作简单。

➤惰性介质，非特异性吸附极低。

➤分离条件温和，目的蛋白回收率高。

➤流动相中存在的离子、小分子杂质、去污剂等不会对分离产生影响。

➤适用体系pH范围广。

凝胶过滤介质主要应用：

➤组群分离：脱盐/置换缓冲体系，上样体积可达柱床体积的25-30%。

➤组分分离：分离不同分子量大小的蛋白、病毒粒子、聚体去除，上样体积一般为柱体积的1-5%，且柱床高度要求≥60cm。

凝胶过滤介质的分类：

葡聚糖凝胶 G 系列

丙烯葡聚糖凝胶 S 系列

琼脂糖凝胶系列

葡聚糖凝胶主要用于生物分子脱盐，低分子蛋白，多肽，多糖的分离纯化。

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化，并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

交联度越高，凝胶孔径越小,溶胀系数越小。通过改变交联度来控制孔径的变化，对特定分子大小的选择，影响凝胶的耐压及化学稳定性。

Sephadex G-10 G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克。

葡聚糖凝胶 LH 系列主要应用于分离脂溶性物质，例如胆固醇、脂肪酸激素等。

Sephadex LH-20和LH-60是Sephadex G-25和G-50中分别加入羟丙基基团反应形成的，球蛋白分离范围分别为100-4000 和4000～20000。

Sephacryl 是葡聚糖与甲叉双丙烯酰胺交联而成。是一种比较新型的葡聚糖凝胶。广泛应用于酶、多糖、核酸和蛋白质等生物大分子的分离纯化，γ-干扰素、白介素-Ⅱ、蛋白质A和乙肝疫苗等生物制品生产过程中，均使用此类层析介质。与葡聚糖凝胶相比，它的优点是：

1.分离范围更大：

排阻极限可以达到10E8。不仅可以用于分离一般蛋白，也可以用于分离蛋白多糖、质粒、甚至较大的病毒颗粒。

2.化学和机械稳定性更高：

在各种溶剂中很少发生溶解或降解，可以用各种去污剂、胍、脲等作为洗脱液，耐高温，稳定工作的pH一般为3~11。

3.机械性能更好：

可以以较高的流速洗脱，比较耐压，分辨率也较高，可以实现相对比较快速而且较高分辨率的分离。

主要用于病毒，病毒载体，外泌体等超大生物分子的分离纯化。

琼脂糖凝胶过滤介质因其合成过程中琼脂糖含量的不同会产生大小分布不同的胶束孔，形成不同的分子量分离效果。

Sepharose 4B和Sepharose 6B：4%和6%的琼脂糖凝胶过滤介质，内部分子结构靠氢键固定，耐压性能较差。

在Sepharose 4B和 6B的基础上，对其进行低强度与高强度交联处理，生产出了耐压性能更好的交联琼脂糖系列，提升介质结构刚性，提高处理流速与耐压性能，满足工业规模凝胶过滤分离纯化的需要。

Sepharose CL-4B、Sepharose CL-6B：高耐压琼脂糖系列介质产品。

Sepharose4FF、Sepharose 6FF：高流速琼脂糖系列介质产品。