产品规格：20 μL×20T, 20 μL×100T

产品内容

* MasterMix 包含以下组分：逆转录酶，RNA 酶抑制剂，dNTPs, buffer, Oligo(dT)20和随机引物。
储存条件：储存于-20℃，有效期见外包装。

产品介绍 

     UEIris II RT-PCR System for First-Strand cDNA Synthesis 是将RNA合成cDNA的一个操作更为简便的系统， 含有第一链 cDNA 合成所需的全部试剂，仅需加入 RNA 模板，dsDNase 和水即可进行逆转录反应。合成的第一链 cDNA 可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR 扩增、 Real Time PCR 反应等。

UEIris II 预混液中的逆转录酶是全新开发的新一代逆转录酶。该酶具有更快的反应速度，只需 10 min 即可完成逆转录反应。该逆转录酶还具有产物得率更高、获得的 cDNA 片段更长、模板使用范围更广等特点。

    试剂盒中的 dsDNase 特异性消化双链 DNA，而不消化单链 DNA 和 RNA，并且具有热敏感性，可在 55℃快速地不可逆失活，实现去除基因组污染与逆转录反应同步完成。

使用方法

1. 在冰浴的无核酸酶的离心管中配制下列逆转录体系：

2. 轻轻混匀，瞬时离心（使液体沉于底部）； 

3. 在 PCR 仪上进行下列条件的反应： 37℃温育 2 分钟，去除基因组污染 55℃，孵育 10 min（若目标 RNA 小于 3 kb，可适当缩短反应时间至 5 min） 85℃，10 sec 

4. 将获得的产物迅速置于冰上或立即保存于-20℃，用于后续实验。

注意事项 

    1. RNA 模板的纯度和完整性是影响逆转录效果的重要因素， 如模板中含有蛋白、EDTA、酚等杂质或 RNA 降解。 

    2. 若后续实验为 qPCR，逆转录产物的加量应不超过PCR 体系终体积的 1/10，如 20 μL 的 PCR 反应体系，逆转录产物的加量应不超过 2 μL。 

    3. 预混液中已经包含 Oligo(dT)20VN 和随机引物，不仅适用于包 Poly(A) 结构的真核生物 mRNA，也适用于不含 Poly(A)结构的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 等 模板，但不适用于 miRNA 等小 RNA 模板。