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备注
BN14014-5 mg
5 mg
¥2400.00
产品描述
应用范围:神经荧光染料
产品参数
外观:可溶于水的红色固体
Abs/Em(in MeOH):510/625 nm
Abs/Em(in membranes):~480/600 nm
CAS 号:149838-22-2
贮存条件:4 ℃避光保存
保质期:12 个月
分子式:C30H49Br2N3
分子量:612
结构式:
产品介绍
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用 于跟踪神经肌肉接头或突触的突触活动。这类染料通常具有 亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。 NerveGreen 系列探针是具有单个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡 来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分 没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。 神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因 此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成 的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递 质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的 变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光 增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾 部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高 的结合速率和较低的解离速率。
NerveGreen C4(FM1-43)是一种广泛使用的绿色荧光 染料,通过染色突触的突触囊泡或神经肌肉接头来跟踪突触 活动。结合使用红色荧光染料 NerveRed,突触和神经肌肉 接头可以独立两个颜色成像。
实验操作
以下是盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色方案。
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜; 在室温或 37℃下,染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用 Tyrode 溶液或其它缓冲液,可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒素(TTX),其目的是阻断动作电位并防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。
1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min,使细胞完全浸没。
2. 将盖玻片转移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室温下孵育 1 min。
3. 室温下,用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。
4. 荧光显微镜下拍照观察。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。