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备注
BN14052-1 mg
1 mg
¥1560.00
产品描述
应用范围:核酸染色
贮存条件: 4℃避光保存
产品参数
外观:可溶于 DMSO 和 MeOH 的红色固体
λEx/λEm = 528/617 nm(结合 DNA)
λEx/λEm = 493 nm(未结合 DNA)
保质期:12 个月
CAS 号:61926-22-5
分子式:C46H50Cl4N8
分子量:857
分子结构图:
产品介绍
Ethidium Homodimer-I (EthD-I)是一种高亲和性的荧光核酸染料,与 DNA 或 RNA 结合后,可以使荧光增强 30 多倍。用于哺乳动物、细菌、酵母和真菌的染色。Ethidium Homodimer-I (EthD-I)带有较强正电荷,所以该染料不能穿过细胞膜进行活细胞染色。但是 EthD-I 可以准确的检测溶液中的核酸或者解体细胞中的核酸,是一种较灵敏的核酸染色剂。
使用方法
注:该操作说明适用于大多数细胞,但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果,本说明仅供参考。
1. 储存液的制备:取适量DMSO加入到Ethidium Homodimer-I中,配制成2mM储液,该储存液可于-20℃稳定保存一年。
2. 将20μl 2mM储液加入到10ml无菌的组织培养级别的 D-PBS中,充分涡旋混匀,使其终浓度为4μM(推荐浓度为 0.1-10μM,不同细胞系建议梯度设置确定最佳染色浓度)。
3. 吸取上述配置好的工作液100-150μl加入到细胞盖玻片上使其完全覆盖。孵育最好是在含有盖子的盘子里防止染色液挥发。
4. 室温孵育30-45min,若染色液浓度过高或温度过低可适当减少孵育时间。
5. 向一个新的显微镜载玻片上加入10μl D-PBS。
6. 使用尖镊子小心且迅速将载有细胞的盖玻片倒置加在含有D-PBS的载玻片上,为了防止染色液挥发,用干净透明的指甲油封住载玻片四周。
7. 在荧光显微镜下观察细胞染色情况。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。