应用范围：神经荧光染料

产品参数 

外观：可溶于水的紫色固体 

Abs/Em (in MeOH): 543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure) 

Abs/Em (in membranes) :510/750 nm 

贮存条件：-20℃避光保存 

保质期：12 个月 

分子式：C30H45Br2N3 

分子量：607.51

产品介绍 

神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料，用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部（两个碳链）和带阳离子的高亲水性头部。 NerveRed 系列探针是具有三个双键的染料。

阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成 的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率 ——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。

NerveRed C2 染料不能用于固定细胞染色，固定细胞的染色可选择 NM 系列染料。

实验操作 

以下是盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色方案。

神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜; 在室温或 37℃下，染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用 Tyrode 溶液或其它缓冲液，可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒 素（TTX），其目的是阻断动作电位，防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。

1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min，使细胞完全浸没。 

2. 将盖玻片转移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素（TTX）溶液中，室温下孵育 1 min。 

3. 室温下，用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。 

4. 荧光显微镜下拍照观察。

图. FM4-64 在脂质体中的吸收和发射光谱。