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产品规格
售价
备注
BN20710-5ml
5ml
¥60.00
10ug/ml
BN20710-50ml
50ml
¥240.00
10ug/ml
产品描述
浓度:10ug/mL
保存:-20℃避光保存, 一年有效。
产品简介:
Hoechst 33342,也称 bisBenzimide H 33342 或 HOE 33342,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察 或流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA 染色。 Hoechst 33342 的最大激发波长为 346nm,最大发射波长为 460nm;Hoechst 33342 和双链 DNA 结合后,最大激发波长为 350nm,最大发射波长为 461nm。本Hoechst 33342 染色液为即用型,可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
使用说明:
1. 对于固定的细胞或组织:
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33342 染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品 3 倍体积的染色液,混匀。室温放置 3-5 分钟。
c. 吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量 Hoechst 33342 染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入 1ml 染色液,对于 96 孔板一个孔需加入 100 微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养 20-30 分钟。弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可进行荧光检测。
注意事项:
荧光染料都存在淬灭的问题,为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后应立即观察。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。