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产品规格
售价
备注
BN12032-50 μL
50 μL
¥1388.00
产品描述
应用范围:实时定量 PCR、高分辨率溶解曲线
产品参数
λabs/λem = 500/530 nm (结合 DNA)
λabs = 471 nm (未结合 DNA)
储存条件:4℃ 或-20℃,避光保存,有效期 1 年。
产品介绍
Super EvaGreen®是一种用于实时定量 PCR(qPCR) 的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I。除了有相似的光谱特性,Super EvaGreen 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I。
首先,Super EvaGreen®对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I。因此,使用 Super EvaGreen®进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤。同时,Super EvaGreen®在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于 SYBR Green I 扩增信号。较高浓度的 Super EvaGreen®也消除了“染料重 分布”的缺陷,使 Super EvaGreen®既可用于多重 PCR,也可用于高分辨率(高清晰)溶解曲线分析(HRM)。该分析正被越来越多的用于 PCR 后的基因分型和异源双链分析。 由于 SYBR Green I 对 PCR 的抑制性,从而要求其使用浓度必须很低,因此 SYBR Green I 无法解决由低浓度造成的 染料重分布问题,既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM。 同时,染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性, 因为低熔点的 DNA 链可能由于这种原因而无法检测到。
第二,Super EvaGreen®的稳定性极强。在正常的储存、操作和 PCR 过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。与之相反,SYBR Green I 不稳定而且降解后对 PCR 抑制性更强。
第三,Super EvaGreen®降低了细胞膜透性,因而比 SYBR Green I 更加安全。独立实验室的测试结果显示,Super EvaGreen®既没有诱变性也没有细胞毒性。相反,虽然 SYBR Green I 本身诱变性很弱,但它在细胞中可能抑制了正常 DNA 的修复机制,使其有诱变增强作用。考虑到 PCR 的广泛使用,其安全性应该足够重视。
使用方法
1. 如下建立实验体系:(仅供参考)
2000 × Super EvaGreen®储液先用去离子水稀释 100 倍,制备成 20 × Super EvaGreen®的工作液。
实验目的:实时定量 PCR 检测 2000 × Super EvaGreen®